1 试剂准备区

1.1 到配电房先打开风机（先开送风机，再开排风机），再把空调系统打开。

1.2 其它室的用品不得带入本室。

1.3 从PCR实验室号入口门进入实验室，到达试剂准备区的缓冲间，更换专用工作服，进入试剂准备区，实验中须戴一次性手套，手套常更换。

1.4 打开已灭菌的超净台，通风一段时间，排走臭氧。取出当次实验需配制和使用的试剂，其余试剂要立即收好放回冰箱内。

1.5 实验作业完成时，应及时清理工作台，做好实验登记，应使用本室专用的记录本和笔，打开超净台的紫外灯旋钮到20分钟处。使用过的离心管、吸头须置于3%的HCl溶液中浸泡、消毒后方可弃之。

1.6 打开传递窗门，垫上一次性手套，将配好的试剂放到传递窗里，关上传递窗门。

1.7 在试剂缓冲间脱下工作服，穿上白色工作服。

2 标本制备区

2.1 在标本制备区的缓冲间，换上标本制备间专用的工作服，进入标本制备区。

2.2 打开传递窗的门，取出配好的试剂，使用本区专用的加样器和带滤芯枪头。

2.3 实验作业完成时，应及时清理工作台，使用过的离心管、带滤芯枪头须置于3%的HCl溶液中浸泡、消毒后方可弃之。

2.4 做好实验登记，应使用本室专用的记录本和笔，打开超净台的紫外灯旋钮到20分钟处。

2.5 打开传递窗门，垫上一次性手套，将配好的试剂放到传递窗里，关上传递窗门。

2.6 提取基因组模板，提取过程中丢弃的枪头、离心管和废液请丢弃在此垃圾袋并于实验结束后立即将垃圾袋扎口丢弃。提取质粒可先提取野生型质粒再提取突变型质粒。每次提取工作完成后擦拭台面。

3 扩增区

3.1 在扩增间的缓冲间，换上扩增间专用工作服。

3.2 打开传递窗门，取出配好的试剂，关上传递窗门。

3.3 打开PCR仪预热20min。

3.4 将反应管放入PCR仪中，关好门。

3.5 脱掉手套，设定程序，并命名。

3.6 结束后取出PCR仪里的试剂，用袋子包好方可弃之。机器上不允许存放PCR扩增产物，每次实验后请自行及时清理PCR扩增产物。

4 产物分析区

4.1 在产物分析区的缓冲间，换上扩增间专用工作服。

4.2 打开传递窗门，取出反应完的试剂，关上传递窗门。

4.3 按设备操作规程分析产物。

4.4 实验作业完成时，将枪调至最大量程，及时清理工作台，做好实验登记，离开功能间后打开紫外灯照射20分钟。使用过的离心管、吸头须置于3%的次氯酸钠溶液中浸泡后方可弃去。

4.5 结束实验后，到配电房先把空调系统关掉，再关掉排风机，之后关掉送风机。

5 传递窗的使用

5.1 传递窗每天早上灭菌20分钟一次。当天使用可不用再次灭菌。将试剂放到传递窗时，在底下垫上一层手套。

6注意事项

1） PCR实验室各室使用、进入及单一流向制度，严格按照规程操作，以免造成污染实验室的严重后果。

2） 进入各室时请关好门。

3） 废液缸中的枪头满到3/4时，要及时倒到废物箱中。

4） 缓冲间的内外两个门不能同时开启。

5） 每位技术员使用独立的配液盒不得混用。